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elisa試劑盒的實(shí)驗(yàn)操作注意事項(xiàng)
發(fā)布時間： 2016-02-24 點(diǎn)擊次數(shù)： 1401次elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)操作注意事項(xiàng):
1、 試劑價格較高，實(shí)驗(yàn)前有任何疑問及實(shí)驗(yàn)中有任何問題請及時與本公司取得，避免造成損失！2、 試劑盒應(yīng)在2～8℃冰箱內(nèi)儲存，且注意不可凍結(jié)。
3、 請勿使用過期的試劑盒或其中的組件或混用不同批次試劑盒的試劑，以免降低靈敏度。
4、 0標(biāo)準(zhǔn)品的A450nm<0.6時，表示試劑可能變質(zhì)，請勿使用；顯色劑變藍(lán)，表明已變質(zhì)，請勿使用。
5、 將試劑盒內(nèi)試劑稀釋或者改變其濃度將會影響檢測結(jié)果。
6、 當(dāng)從冰箱中取出試劑盒進(jìn)行檢測時，應(yīng)將試劑盒于室溫（20～26℃）下放置半小時以上，使其溫度回升至室溫。
7、 試劑盒內(nèi)的各種試劑在使用前應(yīng)充分搖勻（酶標(biāo)物溶液輕搖即可，不可起泡），以確保試劑濃度的均一性。
8、 微孔條按需使用，將剩余的微孔條立即放入包裝袋中，于2～8℃干燥密封的條件下保存。
9、 向酶標(biāo)板微孔中加入試劑或樣品時，為確保操作的一致性，加液時槍頭應(yīng)垂直懸空至板孔正中央，保證樣液應(yīng)加至孔中央，動作迅速，避免槍頭接觸孔壁，避免樣液濺到孔壁或?yàn)R出微孔，造成不必要的非特異性吸附或損失。特別是加入共同試劑（如酶標(biāo)抗體），由于可能會用到排槍，該操作尤為重要。
10、 加樣完畢后，應(yīng)將酶標(biāo)板至于振蕩器或用移液器槍頭輕敲，使孔中液體充分混勻，但需注意的是切勿不可將孔中的液體搖出，影響檢測結(jié)果。
11、 樣品前處理注意事項(xiàng)：尿樣，若樣品中出現(xiàn)渾濁或沉淀，可將其至于離心機(jī)中適當(dāng)離心，取其上清液作檢測樣品;肝樣或肉樣，請參照說明書提供的方法進(jìn)行提取。于水浴鍋中提取時，水浴應(yīng)始終保持沸騰，若由于其他原因達(dá)不到所需溫度（但不得低于85℃），可適當(dāng)延長提取時間，直至組織樣品明顯變色為止（由紅色變黃褐色或白色），且趁熱進(jìn)行離心，離心力保持在4000g/r以上以保證上清液澄清。
12、 如果選擇室溫條件下反應(yīng)，在整個檢測過程中，應(yīng)保持溫度在20～26℃之間，同時為了避免反應(yīng)過程外界環(huán)境因素的影響，酶標(biāo)板上應(yīng)貼上一層薄膜或置于封閉環(huán)境中避光反應(yīng)；如果選擇37℃條件下反應(yīng)，建議在水浴鍋中進(jìn)行，且酶標(biāo)板上也應(yīng)貼上一層薄膜，防止試劑的揮發(fā)。
13、 洗板時如果選擇蒸餾水作為洗液，要保證洗滌用水的pH范圍在6～8之間；如果水質(zhì)較差請選擇試劑盒配備的濃縮洗液稀釋后作為洗液。為了確保洗滌的一致性，建議洗滌時采用專門配置的洗板機(jī)，反復(fù)洗滌6次，每次洗滌的體積以溢滿微孔為宜（約300μL）。如用其他方法洗板時，請注意操作方法，避免清洗不*或產(chǎn)生交叉污染。
14、 在加入酶底物液進(jìn)行顯色時，可向板孔中先加50μL的底物緩沖液，然后再加入50μL的底物液（注意加完后混勻液體），或者將底物緩沖液和底物液充分混勻后（混勻容器應(yīng)潔凈，現(xiàn)配現(xiàn)用），再向每孔中加入100μL的混合液。
15、 終止液含有1mol/L硫酸溶液，避免皮膚直接接觸，操作時要注意安全。
16、 推薦使用高質(zhì)量的吸頭及移液器，且吸頭不可反復(fù)使用（難以清洗干凈）。